Diabetologia：应答但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次注意到家兔自身血清到注意到1DF肾病医学腹泻的令人满意率在成年人时期就有极好的揭示，多个家兔自身血清乙DF肝炎的成年人里面有70%在血清转化后10年内患上肾病，而随访15年的成年人这一%提高到84%。相对来说之下，占医学1DF肾病一半以上的DF1DF肾病的胃癌程序还不能得不到前提的研究成果。

更为多的人开始常用分期系统来定义1DF肾病的令人满意：生物体在注意到多种家兔自身血清时转到第1过渡阶段，注意到血糖所致时转到第2过渡阶段，注意到腹泻时转到第3过渡阶段。一些多发家兔自身血清乙DF肝炎的生物体，在1期和2期，令人满意较慢，并发展为胃癌的1DF肾病。我们之前揭示了一三组在首次检测到多种家兔自身血清抽取后最多于10年无肾病的极慢令人满意者，这三组病人总人数多于，但不同之处非常明确。随后，我们发现家兔自身复合物特异性CD8+T受体质反应在令人满意较快的病人里面基本不普遍存在，但在近期胃癌和长期普遍存在的肾病病人里面很容易检测到。这或许表明，与令人满意病人相对来说，这些病人自身免疫反应的调节提升。

早期研究成果表明，尽管调节性T受体质(Treg)使用量但会，但肾病病人普遍存在一些机能缺陷，其里面都有对IL-2的反应灵活命性提高。此外，肾病病人里面的波动CD4+T受体质或许对调节更具抵抗性，表现为波动T受体质的减缓减慢，人为激发的Treg和体外激发的作用于Treg，以及复合物历程的CD4+T受体质里面IL-2反应减慢。本研究成果的目的是揭示了CD4+调节性T受体质(Treg)在群集极较快令人满意者里面的不同之处，他们的平均岁数为43岁(31-72岁)，随访星期为18-32年。

方法：BOX研究成果是一项以一些人为了将的纵向研究成果，在21岁以下肺炎的病人亲属里面检查1DF肾病的危险因素。我们之前揭示了长期较快令人满意者的不同之处，他们保有多重家兔自身血清乙DF肝炎超过10年，但不能注意到肾病的医学腹泻，慢性或非来外阴自身免疫。随后，10名暂时保有无肾病并愿意提供大量肝脏抽取的较快令人满意者纳入T和B受体质机能统计分析。在目前的研究成果里面，8名慢令人满意者(SP三组)，里面位岁数43岁(31-72岁)，18 - 32岁两者之间的家兔自身血清乙DF肝炎。所有的与会者都所处1DF肾病令人满意的1期，尽管一些人随后失掉了家兔自身血清对某些复合物的乙DF肝炎反应，然而，一名病人已经所处2期最多于6年，但不能注意到医学腹泻，一名病人被诊断为肾病，该病人72岁，在挖掘出飞行测试中抽取时，其HbA1c下降时到53 mmol/mol(7%)，在数据统计分析里面对该NADPH来进行了除此以外统计分析报告。复合外周血单个核受体质(PBMCs)，采用多参数流式受体质法术和T受体质减缓飞行测试统计分析报告NADPH里面Treg的kHz、基因DF和机能。常用FlowSOM和CITRUS(聚类深入研究、并不一定和重回)来进行无监督聚类统计分析，统计分析报告Treg基因DF。

结果：与有益NADPH相对来说，来自慢令人满意体的清醒CD4+T受体质的监督聚类辨识，抑制的清醒CD4+ TregkHz提高，与糖皮质激素作用于的TNFR之外受体(GITR)理解提高有关。一名HbA1c下降时的病人与令人满意较快者和反之亦然的折衷三组相对来说，Treg谱有所完全相同。机能新发现，与有益NADPH相对来说，来自较快令人满意体的Treg介导的CD4+波动T受体质减缓相对来说受损。表现为对波动CD4+T受体质CD25和CD134理解的减缓提高。

三幅1 集中的基因DF统计分析辨识，CD4+Treg亚DF在慢令人满意路由表里面提高。由FlowSOM生成的Treg室，有数在来自所有NADPH的活命CD4+CD45RA -受体质上。根据标示物理解深入研究出10个元簇:清醒T受体质_1;清醒T cell_2;清醒T cell_3;清醒T cell_4;CD49b清醒T受体质;HLA-DR + GITR +清醒T受体质;寄存器Treg_1;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;和寄存器Treg_4。(a)常用9个完全相同Treg标示生成的10个元簇的MST。每个路由表象征性一个空降兵(100个空降兵)，极大的元空降兵(10个元空降兵)在路由表三组外面上色。每个路由表里面的甜品三幅透露单个标示的理解最高级别。(b)每个元聚类的热三幅，以辨识整体标示理解。(c, d)为HD三组(c)和SP三组(d)生成三幅，以及FlowSOM辨别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相较轻元素为每个metacluster盒该线三幅(轻元素> 0.05%)确认为HD和SP三组:寄存器Treg_2 (e),寄存器Treg_3 (f),寄存器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +清醒T受体质(h)、清醒T cell_1(i),清醒T cell_2 (j),清醒T cell_3 (k) n d CD49b清醒T受体质(l)。粉红色格子象征性**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对字母秩筛选。此键适用于三幅形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

三幅2 常用CITRUS的预测模DF证实，TregkHz的提高是令人满意较快的标志。分级相关联(a - f)和柑橘统计分析(g-k)比较SP与会者和反之亦然的HD与会者在CD4+CD45RA−T受体质上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会群体的象征性性三幅。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR理解来进行复合，模拟FlowSOM社会群体。(b) HD(黑点)和SP(斑点)三组以及NADPHSP 606(粉红色)里面CD25+ cd127的kHz综合三幅。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+相关联子集的盒该线三幅;(c) HLA-DRloGITR−(寄存器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(寄存器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(寄存器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+寄存器T cell)。(g - i)柑桔簇折叠由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3理解强度着色，斜该线出彩的簇被辨别为SP和HD路由表两者之间的完全相同。(j)盒该线三幅辨识了在SP(斑点)和HD(灰点)三组里面，CITRUS清醒Treg_3和Treg_4的相较轻元素(%)。(k)直方三幅辨识每个簇的基因DF(粉红色)和Treg标示相较理解与氛围理解(金色);上列，寄存器Treg_3;下面一行，寄存器Treg_4。氛围与所有其他簇里面标示的理解有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对字母秩筛选

三幅3 与有益献血者相对来说，令人满意较快者清醒treg的GITR提高。每个清醒CD4+T受体质元簇(清醒T受体质_1;清醒T cell_2;清醒T cell_3;CD49b +清醒T受体质;HLA-DR + GITR +清醒T受体质;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检测每个理解标示的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)路由表的理解热三幅(sp606不都有在内)。(c,d)清醒Treg_4元簇里面所有HD(棕色)、所有SP(金色)和SP 606(粉红色)的FlowSOM GITR理解串联，辨识直方三幅(c)和综合三幅(d)。Wilcoxon配对字母秩和筛选，p< 0.07(粉红色)所有NADPH都有，p< 0.05(金色)NADPHSP 606和反之亦然的HD不都有在测试里面。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里面GITR理解，从分级相关联，从所有HD(棕色)、所有SP(金色)和SP 606(粉红色)串联，辨识直方三幅(e)和综合三幅(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对字母秩筛选

三幅4 来自较快令人满意的CD4+ treg受体质操纵波动CD4+T受体质的灵活命性提高。SP三组用金色的该线和格子透露，HD三组用蓝色的该线和格子透露，粉红色的该线/格子透露NADPHsp606。常用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T受体质来进行分选。CD4+CD25−(此番者)被标示为CFSE, Treg按注意到的%溶液。用抗CD3 /28微珠酪氨酸受体质，培训3同月来进行流式受体质法术检测。(a-d)与CD4+此番者相较应的treg培训(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD此番者培训。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE减缓一般而言(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的减缓一般而言。常用乙DF肝炎折衷(抑制的响应受体质不含treg)量化减缓一般而言。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差统计分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

三幅5 波动CD4+T受体质对较快令人满意的T受体质酪氨酸的减缓更引人注目。SP三组用金色的该线和格子透露，HD三组用蓝色的该线和格子透露，粉红色的该线/格子透露NADPHsp606。常用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T受体质来进行分选。CD4+CD25−(此番者)被cfsel标示，treg按注意到的%溶液。用抗CD3 /28微珠酪氨酸受体质，培训3同月来进行流式受体质法术(CD25反染)和受体质因子统计分析。HD Treg与HD、SP或sp606此番者协同培训。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE减缓前年(b)。(c,d) CD25减缓前年(c)和CD134减缓前年(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培训里面的理解。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差统计分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

事实：我们得出的事实是，来自较快令人满意子的酪氨酸清醒CD4+Treg在GITR理解里面得不到了扩展和珍贵，强调了全面研究成果Treg在1DF肾病可能性生物体里面的异质性的必要性。

书名出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28